腫瘤治療是現代醫學面臨的一項重大挑戰。腫瘤免疫細胞治療是一種新興的特異性強、副作用小并具有廣闊發展前景的治療方法。近兩年來，除了CAR-T療法備受萬眾矚目外，另外一種新的癌癥細胞療法——自然殺傷（NK）細胞療法也逐漸受到關注。研究人員說，NK細胞作為一種細胞抗癌療法更具潛力，它可能會更安全、更便宜、更快速。

人體內沖鋒陷陣斗士——NK細胞   

NK細胞是人體第三類淋巴細胞，又被譽為天然免疫的核心細胞，約占淋巴細胞循環數的5%~15%，是對抗癌細胞的天生戰士。其表面缺少T細胞和B細胞的特異性標志如TCR和Smlg，曾稱為裸細胞。NK細胞最厲害的地方是，不需要抗原遞呈過程，不用別人通風報信，就可以直接、快速將外來異物（病毒細菌感染細胞、癌細胞、衰老細胞等）就地正法。

在面對癌細胞時，NK細胞不需要其他細胞的激活與刺激，便能直接識別并殺死癌細胞，因此，也被稱為人體抗癌第一道防線。

如果將人體當成一場“戰疫”的縮影，那么當面對病毒或癌細胞攻擊時，我們的社會也會啟動“免疫反應”，成千上萬的醫務工作者奔赴疫情嚴重地區。若要用人體的一種免疫細胞來形容醫務工作者的話，很容易會聯想到人體內先天性免疫系統的自然殺傷細胞（NK）細胞。                    

自然殺傷細胞（黃色）攻擊癌細胞（來源：科學之眼）  

正在如火如荼開展的2022年AACR大會上，也少不了NK細胞療法的身影。NK細胞創新療法Affimed公司日前在AACR大會上公布了其來自捐贈的臍帶血的自然殺傷 (NK) 細胞與一種名為 AFM13 的新型雙特異性抗體結合使用，該抗體靶向 CD16A 和 CD30，治療接受過多線預治療（復發/難治）的CD30陽性霍奇金和非霍奇金淋巴瘤患者的1/2期臨床試驗的最新結果。

客觀緩解率高達100%！NK細胞療法治療淋巴瘤效果驚艷！  

目前用于腫瘤免疫治療的NK細胞策略有：體外活化的自體或異體NK細胞治療；聯合NK細胞和單抗藥（如免疫檢查點抑制劑）來誘導抗體特異的細胞毒性；構建CAR-NK細胞免疫療法。

大多數公司都采取開發CAR-NK細胞的方式來進行治療，而Affimed公司此次研究則另辟蹊徑，將沒有靶向能力的NK細胞與賦予細胞靶向能力的先天細胞接合器結合在一起。這種分子的優勢就在于可以靶向不同的腫瘤靶點，從而賦予NK細胞治療不同癌癥類型的能力。

迄今為止，該研究招募了22例復發或難治性CD30+霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤患者，他們接受了中位七線治療�；颊咭�3個劑量水平入組：DL1 (106NK/kg)、DL2 (107NK/kg) 和 DL3 (108NK/kg）。迄今為止，在 DL1 (N=3)、DL2 (N=3) 和 DL3 (N=13) 治療了19例患者；18例已完成兩個計劃周期。

19例患者的客觀緩解率（ORR）為89%，包括8例完全緩解（CR）、9例部分緩解（PR）、2例疾病進展（PD）。

在中位隨訪 6 (2~16) 個月時，所有三個劑量水平的無進展生存率和總生存率分別為 58% 和 79%。NK細胞在輸注后立即發生擴增并持續兩周。

三級劑量（108NK/kg）被確定為推薦的 II 期劑量（RP2D）。13名患者在接受兩輪治療后，達到100%的客觀緩解率（ORR），并且完全緩解率從接受第一輪治療后的38%提高到62%。

在療效為完全緩解的8例患者中，中位隨訪時間為6.5個月，7例患者仍完全緩解，其中2例患者在10個月后仍然維持完全緩解。2例患者接受干細胞移植并在6.5個月后仍然有反應。

值得一提的是，納入的患者多為復發難治性患者，之前接受過至少7線治療；除了多線化療失敗外，所有霍奇金淋巴瘤患者的維布妥昔單抗(Brentuximab Vedotin)和PD-1治療均失敗。

此項臨床研究的結果格外令人驚喜，據悉納入的患者均已對治療選擇產生耐藥性，在如此復雜艱難的條件下，NK細胞聯合AFM13依然能達到100%的客觀緩解率及62%的完全緩解率，不得不說是目前在難治性霍奇金淋巴瘤患者中獲得的最佳緩解率。

給NK細胞裝上“彈頭”，CAR-NK殺傷力倍增 

對于細胞免疫療法發展比較成熟的血液腫瘤來說，實體瘤才應該是抗癌的“主戰場”！雖說是主戰場，但是細胞免疫療法在廣闊的實體瘤領域發展可謂是捉襟見肘，舉步維艱。如2021年最新的全球癌癥數據指出，約90%的癌癥發病率都是由實體瘤引起，但關于實體瘤的細胞治療臨床試驗卻很少（實體瘤占40%，且大部分處于早期階段）。為此，CAR-T細胞療法取得的成功激發了人們對用CAR基因修飾NK細胞來增強其殺腫瘤能力的熱情。

CAR-NK就是利用基因工程給NK細胞加入一個能識別腫瘤細胞，并且同時激活NK細胞殺死腫瘤細胞的嵌合抗體。 嵌合抗原受體能顯著提高NK細胞療效特異性。這個思路和CAR-T的構建類似：CAR包括胞外的識別結構域（如scFv）識別腫瘤特異性抗原；一個跨膜結構域，和一個胞內信號結構域（CD3ζ 鏈）可以誘導NK細胞的活化。   

圖為構建CAR-NK細胞免疫療法的過程   

CAR-NK細胞比CAR-T細胞具有多個優勢     

01  與CAR-T細胞不同，CAR-NK細胞保留了通過其天然受體識別和靶向腫瘤細胞的內在能力，從而通過CAR-NK靶向治療時，腫瘤細胞能夠逃脫殺傷的可能性降低。

02  CAR-NK細胞在數天至數周內不會發生免疫排斥反應。因此，它們在許多CAR-T臨床試驗中均未表現出相同的安全問題，例如沒有細胞因子釋放綜合征的困擾。

03  NK細胞不需要嚴格的HLA匹配，并且沒有引起移植物抗宿主病的潛力，這卻是CAR-T細胞免疫療法一種重要的風險。

實體瘤     

1、創新CAR-NK療法FT536獲FDA批準用于臨床試驗 

2022年1月10日，Fate Therapeutics公司宣布， 美國FDA已批準FT536的新藥臨床研究（IND）申請。 FT536是一款經過多重工程修飾、誘導多能干細胞（iPSC）衍生的 “即用型”嵌合抗原受體（CAR）自然殺傷（NK）細胞療法。   

FT536表達一種特異性靶向I類主要組織相容性復合體（MHC）相關蛋白A和B（MICA/MICB）α3結構域的新型CAR。 MICA和MICB屬于應激蛋白，在許多實體瘤上高水平表達。 癌細胞經常通過MICA/B的α1和α2結構域的蛋白水解脫落來逃逸免疫細胞識別。此前有研究發現，靶向MICA/B的α3結構域的抗體能夠特異性地阻止MICA/B脫落，恢復NK細胞介導的免疫力。 此次FT536獲批臨床應用， 表明MICA和MICB正在成為廣泛的實體瘤中令人興奮的癌癥免疫療法靶標， 而FT536也代表了一種靶向這些應激誘導配體的新型治療策略。關于此款療法的多中心I期臨床試驗開展的腫瘤類型包括：晚期非小細胞肺癌、結直腸癌、頭頸癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌。 

2、“現貨型”CAR-NK療法向“癌王”胰腺癌發起進攻 

2022年1月6日，在國際胃腸病領域權威雜志《Gastroenterology》刊登了希望之城國家醫學中心和細胞療法創新公司CytoImmune Therapeutics合作開發的重磅研究，研究結果顯示，以前列腺干細胞抗原（PSCA）為靶點的“現成”的CAR-NK療法能夠顯著抑制胰腺癌。  

近年來，隨著醫學臨床研究的深入，人們發現大約60%~80%的胰腺癌表達前列腺干細胞抗原（PSCA），除了胰腺癌，胃癌和前列腺癌等實體腫瘤同樣高表達前列腺干細胞抗原（PSCA）。 為了尋找更有效和創新的實體瘤治療方法，CytoImmune與City of Hope合作開發了一種針對PSCA的嵌合抗原受體（CAR），用于轉導到人類自然殺傷 （NK）細胞中。研究團隊選擇了構建PSCA-CAR，此外還敲入了分泌性IL-15，維持NK細胞的存活。  

CYTO NK-203試驗流程

這款被稱為CYTO NK-203的治療方法，是一種現成的同種異體 CAR-NK 細胞療法，源自臍帶血，并具有提高 NK 細胞安全性和殺傷功效的一種潛在的療法。 CYTO NK-203在人類轉移性胰腺癌小鼠模型中效果顯著，在小鼠體內持續存活超過90天，顯著延長其壽命，且未顯示出治療相關毒性，這項臨床前研究支持該療法在今年進入人體臨床試驗。 研究團隊認為這種CAR-NK療法對胰腺癌治療充滿希望，原因有兩個：首先，該療法基于精準醫學方法，靶向胰腺癌患者的特殊靶點——PSCA；這是一種免疫療法，使用工程化的人類自然殺傷細胞，被改造為專門攻擊癌細胞。 此外，由于前列腺干細胞抗原（PSCA）在胃癌、前列腺癌中也同樣高表達，因為這款CAR-NK細胞療法同樣對胃癌和前列腺癌的治療充滿希望。 

3、國內首個“現貨型”CAR-NK臨床試驗獲藥監局批準 

2021年11月11日，國家藥監局藥品審評中心通過了一款我國自主研發的針對“ 晚期上皮性卵巢癌治療的靶向間皮素（Mesothelin，MSLN）嵌合抗原受體NK細胞（CAR-NK）注射液 ”（簡稱：CAR-NK注射液）的臨床試驗申請。 據無癌家園獲悉， 此款產品是國內首例“現貨型”異體來源的CAR-NK產品。這也標志著我國的免疫細胞藥物治療實體瘤的研究邁入了新的里程碑！

卵巢癌為婦科第二大腫瘤，有70%的卵巢癌患者被診斷時已是晚期。在過去的10年間，我國卵巢癌發病年齡越來越年輕，發病率增長30%，死亡率增加18%。 其在婦科惡性腫瘤中5年生存率最低，僅為39%，5年復發率最高，達到70%。 盡管卵巢癌腫瘤細胞減滅術及以鉑類為基礎的術后化療延長了患者生存期，但約60%患者接受一線化療方案后會復發。目前除了PARP抑制劑能夠滿足30%~40%有基因突變的患者外，目前臨床上沒有更好的藥物及療法來滿足臨床需求。

此款CAR-NK療法的研發有利于提高卵巢癌的治療效果和改善患者生活質量。而且“現貨型”的產品可進行標準化批量生產，從而擴大治療機會，減少治療成本，臨床普及性較高。

4、 1年生存率翻一倍，CAR-NK療法在實體瘤中療效暴增

近期，《臨床腫瘤研究》雜志發布了一項針對肺癌的2期臨床試驗。熱休克蛋白70（Hsp70）在70%左右的中晚期肺癌中高表達，NK細胞在體外先用Hsp70激活，相當于在體外先讓NK細胞與未來的敵人先遭遇、先“結仇”，然后回輸給病人，讓NK細胞在體內正式與癌細胞殊死搏斗——這樣一種在體外先用抗原肽刺激、賦予NK細胞一定特異性的作法，是近年來研究的熱點。

這項臨床試驗一共入組了16例III期非小細胞肺癌患者，一組接受傳統的放化療綜合治療，一組接受放化療聯合Hsp70預激的NK細胞回輸治療。

結果顯示：Hsp70預激的NK細胞回輸治療，配合傳統的放化療，可以將1年的生存率從33%翻倍到67%，初步結果振奮人心。

接下來，小編展示聯合療法中一個典型的成功案例，如圖所示：治療1~2個月后復查，肺部腫瘤完全消失，并且療效已經保持了18個月。

5、采用靶向NKG2D的CAR-NK細胞治療結直腸癌，安全且可行！

在2020年一篇廣州醫科大學的碩士學位論文中，我國研究學者采用靶向NKG2D的CAR-NK細胞治療結直腸癌患者，其初步療效值得肯定，且具有安全性。

本研究中，采用局部輸注 NKG2Dp CAR-NK的方式治療了3 例轉移性結直腸癌患者。前兩例患者腹腔輸注低劑量 CAR-NK 細胞后，可觀察看腹水生成量減慢以及腹水樣本中腫瘤細胞的數量急劇減少。第三例肝轉移瘤患者采用超聲引導下瘤內經皮注射和腹腔內灌注方式輸注 CAR-NK細胞后，多普勒超聲可見肝部腫瘤快速縮小，正電子發射斷層掃描（PET-CT）提示經治療的肝病灶為完全代謝反應。3 例患者在治療過程中均無出現3級或以上的不良事件。

第3例患者多普勒超聲成像顯示局部注射 CAR-NK 細胞降低肝轉移病灶腫瘤負荷

CAR-NK 細胞治療后肝轉移病灶 PEC-CT 結果對比圖

（患者肝Ⅵ段的最大氟脫氧葡萄糖（FDG）攝取值從 8.2 降至 0.14，經評估為完全代謝緩解）

本項研究結果初步顯示 NKG2D mRNA CAR-NK細胞局部輸注治療轉移性結直腸癌患者具有安全性和可行性，為腫瘤免疫治療提供了一種新的策略。

除了上述提到的國內外臨床研究外，CAR-NK細胞還對膠質母細胞瘤和神經母細胞瘤、肝癌等的療效頗佳，特異性識別和高效殺傷乳腺癌腫瘤細胞，對多發性骨髓瘤療效顯著。

血液腫瘤 

1、有效率73%！CD19 CAR-NK對白血病和淋巴瘤效果顯著

根據MD安德森癌癥中心I / IIa期試驗的結果，以CD19為靶點的臍帶血來源的CAR-NK細胞療法，在大多數復發性/難治性非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者和慢性淋巴細胞性白血�。–LL）的患者中顯現出臨床療效，而且未觀察到重大毒性反應。 該試驗結果近日發表在《新英格蘭醫學雜志》上。在參與該研究的11名患者中，  有8名（73％）對治療有反應，其中7名達到了完全緩解！5名有反應的患者繼續接受緩解后治療。沒有患者出現細胞因子釋放綜合征或神經毒性。這意味著他們在中位隨訪13.8個月時無疾病跡象。   CD19 CAR-NK細胞療法起效快，輸注后1個月內就有明顯反應，并且輸注后1年這些細胞依然持續存在。MD安德森干細胞移植與細胞療法教授凱蒂·雷茲瓦尼博士表示：“這項臨床試驗的結果喜人，接下來將開展進一步的臨床研究，探索同種異體臍血來源的CAR-NK細胞療法的安全性和有效性。”

這是一種新型的療法，首先需要從臍帶血庫中存儲的臍帶血中分離出NK細胞，并對它們進行基因工程改造，引入可識別癌細胞表面靶標的CAR。這些CAR NK細胞回輸給患者。

與CAR-T療法相比，其最大的優勢在于不會引起移植物抗宿主�。℅VHD），這是一種在CAR-T療法中常見的由供體T細胞攻擊受體中的健康細胞引起的破壞性疾病。由于NK細胞不會引起GVHD，因此可以將它們從供體提供給接受者，而無需進行匹配。這意味著您可以從一個供體中制備多個劑量的CAR NK細胞來治療多個患者， 從診斷到癌癥治療的時間大大縮短。

圖為患者的治療情況（圖片來自NEJM）   

2、再添利器！iPSC來源的CAR-NK療法針對淋巴瘤效果頗佳！

2021年12月13日，在2021年美國血液學會（ASH）年會上，國外研發公司Fate Therapeutics展示了針對復發/難治性B細胞淋巴瘤（BCL）患者的FT596項目1期研究的積極中期數據。 FT596是一款現貨型、多抗原靶向、iPSC來源的自然殺傷（NK）細胞候選產品。 在ASH大會上，該產品展示了截至2021年10月11日的臨床數據，來自第一、第二、第三單劑量隊列的25例患者中，15例患者（60%）患有侵襲性B細胞淋巴瘤，15例患者（60%）對既往治療無效，8例患者（32%）先前接受過自體CD19 CAR-T細胞治療。

單劑量、單周期數據

在第二、第三和第四劑量隊列的26例患者中，18例患者（69%）在單次劑量FT596后的第29天達到客觀緩解，包括12例患者（46%）達到完全緩解。值得注意的是，在聯合組共12名患者的第三和第四劑量隊列中，9例患者（75%）在單劑量FT596治療后的第29天達到了客觀緩解，其中包括7例患者（58%）達到完全緩解。

長期數據

ASH上的報告包括了第二和第三單劑量隊列中的13例患者的長期數據。截至2021年10月11日， 10例患者處于持續緩解狀態； 2例患者達到6個月的完全緩解，隨后出現疾病進展；1例患者在6個月內出現疾病進展。

NK細胞治療臨床研究進行中

CAR-NK細胞療法是一個很有前途的臨床研究領域，對某些癌癥患者具有良好的安全性和初步療效。與CAR-T細胞相比，CAR-NK細胞具有自己獨特的優點，但仍面臨著一些挑戰。這些挑戰包括細胞增殖的改善，使細胞毒性的激活更有效，以及最終找到NK細胞的最佳重建方法。相信解決好這些問題，基于NK細胞優秀的抗腫瘤血統，極有可能在CAR修飾的武裝下為腫瘤治療帶來新的突破。     目前，無論是中國、日本還是美國，NK細胞培養技術都已經非常成熟。   想了解的患者可以致電無癌家園醫學部（400-626-9916），提交病歷并由專業醫生為您進行評估。    

鑒于CAR-T的成功、CAR-NK的快速發展，將CAR工程技術沿襲用于其他類型免疫細胞的工程化改造引起了研究者們極大的興趣。

根據這種基因工程技術，CAR-NKT、CAR-巨噬細胞（CAR-M）、CAR-Treg、CAR-γδT等異軍突起，在腫瘤的免疫治療中展現出廣闊的前景。之前無癌家園小編就給各位癌友們介紹過以CAR技術為核心的各大新型細胞療法的研究進展。

總之，小編堅信，在未來將會有越來越多的細胞免疫技術和藥物聯合使用的試驗不斷涌現，只要不放棄任何一點希望，攻克癌癥指日可待！