【3540】連續循環腫瘤DNA分析評估III期結直腸癌患者的復發風險、輔助治療的益處、生長率和早期復發檢測

First Author: Tenna V Vesterman Henriksen, Department of Molecular Medicine, Aarhus University Hospital, Aarhus, Denmark

背景：Ⅲ期結直腸癌術后處理的挑戰包括：1）選擇高危患者進行輔助化療（ACT），2）缺乏評估ACT療效的指標，3）評估ACT術后復發風險，4）缺乏用于指導高危患者治療決策的標記物，如額外治療或強化監測循環腫瘤DNA（CTDNA）是一種有潛力緩解挑戰的標記物。在這里，我們使用連續的CTDNA測量來評估復發和CTDNA檢測之間的相關性：術后、術中、afACT和監測期間；為了評估異時性轉移瘤的生長率，我們同時使用CT掃描和CTDNA測量來比較檢測復發的敏感性。

方法：招募2014-2019年在丹麥和西班牙醫院接受治療的Ⅲ期大腸癌患者（n=166），在術前和術后立即采集血樣（n=1227），每3個月采集一次，持續36個月。每位患者16個個體突變用于定量血漿CTDNA（Signatera，定制MPCR-NGS分析）。

結果：CTDNA檢測是術后（HR 7.2，95%CI 3.813.8，P<0.001）和ACT后（HR=18.2，95%Cl）復發的有力預測指標。1-46，P<0.05。治療結束后連續測定（HR=41，95%CI 16-100，P<0.001），CTDNA陽性患者術后復發率為80%（16/20）。在ACT期間保持CTDNA陽性的患者全部復發，連續的治療后CTDNA測量顯示所有復發患者呈指數增長，呈緩慢（26%增加/月）或快速（126%增加/月）模式（P<0.001）。從CTDNA檢測到放射學復發，FAST患者的CTDNA水平為43%，慢復發和無復發患者的CTDNA水平為100%，平均增加117倍，高達554倍。三年總生存期41。95%cl7.5-228，P<0.05。001 ) . CT掃描與CTDNA檢測一致3例，235個事件，平均每位患者2個）顯示高度一致（92%），CTDNA在CT掃描前（n=7例）或同時（n=14例）檢測到殘留疾病。平均提前期為7.5個月。

結論：本研究證實了術后連續CTDNA分析對預后的影響，它提供了新的分析，證明CTDNA比CT掃描對復發檢測更敏感，并可用于腫瘤生長率評估快速和緩慢生長的腫瘤之間的差異表明，生長率可以指導誰快速開始全身治療，誰可以送去診斷。總而言之，這項研究強調了CTDNA在指導臨床決策方面的許多潛在用途。

研究發起人：Danish Cancer Society, Other Foundation, Pharmaceutical/Biotech Company.

參考文獻：Tenna V Vesterman Henriksen,  Serial circulating tumor DNA analysis to assess recurrence risk, benefit of adjuvant therapy, growth rate and early relapse detection in stage III colorectal cancer patients.2021 ASCO,abs 3540.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3541】原發腫瘤位置對轉移性結直腸癌患者抗EGFR抗體二線或二線治療的影響：一項單中心隊列研究

First Author: Anita Archwamety, Division of Medical Oncology, Faculty of Medicine Siriraj Hospital, Bangkok, Thailand

背景：該指南建議抗EGFR單克隆抗體（ANTI-EGFR Ab）僅作為左側RASwild型（RASWT）轉移性結直腸癌（MCRC）患者的首選治療。然而，在隨后的研究中并沒有關于腫瘤側性的建議。本研究旨在評估原發腫瘤位置對RASWT MCRC患者二線或二線治療結果的影響。

方法：回顧性分析2008年至2019年間Siriraj醫院確診的MCRC患者的醫療記錄。KRASWT患者接受抗EGFR抗體二次或二次治療。采用Kaplan-meier法測定腫瘤側位對無進展生存期（PFS）的影響，并用對數ranktest進行比較。

結果：在6/1有KRAS分析數據的患者中，396例（59%）有KRASWT。其中，210名患者在第二次或之后接受抗EGFR抗體治療。29%的患者（210名患者中的60名）進行了RAS分析，30名患者（14%）患有右側腫瘤，180名患者（86%）患有左側腫瘤。69%的患者（210例中的146例）在第三線接受治療，19%和12%分別在第二線和第四線接受治療。單藥iri-notecan是最常用的化療藥物（92%）。與左側腫瘤患者相比，右側腫瘤患者的PFS無明顯下降（中位PFS為4.7個月，95%CI 0.8-8.7 VS6個月，95%ci4.6-7.3；p=0.55 ) . 對原發腫瘤部位影響的亞組分析顯示，治療線對PFS無影響。

結論：本研究表明，抗EGFR抗體二線或二線治療的患者，腫瘤側位對治療結果沒有影響，因此在這些情況下，沒有足夠的證據使用腫瘤側位來選擇治療方案。一項多中心回顧性研究正在進行中。

研究發起人:None.

參考文獻：Anita Archwamety, The effect of primary tumor location on second- or later-line treatment with anti-EGFR antibodies in patients with metastatic colorectal cancer: A singlecenter cohort study. 2021 ASCO,abs 3541.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3542】左右大腸癌的多組學特征

First Author: John Marshall, Georgetown University, Washington, DC

背景：根據預后和對某些治療的反應，右（R）側和左（l）側結直腸癌在臨床上是可以區分的，但到目前為止，解釋這些差異的數據有限。分子測試科學發展迅速。由于技術和計算能力的提高，現在可以獲得涵蓋DNA、RNA、蛋白質、磷酸化蛋白質和代謝組學的系統的多組分數據集。多組學分析可進一步確定疾病特異性亞組，但組織的預分析質量（缺血時間）和與正常組織對照的比較對于優化結果至關重要。

方法：在知情同意后，收集450例結直腸癌原發腫瘤和配對正常組織，采用SOP以盡量減少缺血時間，并采用綜合基因組學、轉錄補體學、蛋白質組學、磷酸化蛋白質組學、形態學和年度臨床信息學（C18）進行分析0、2、3）和左側（C18，6，7）使用機器學習工具對大腸癌腫瘤和正常組織進行比較，以揭示支持這些臨床可區分表型的分子機制，以及與已知基因組指標（如MSI和KRAS突變狀態）的相關性。

結果：利用腫瘤和配對正常患者標本，觀察到左右腫瘤標本的系統性差異，包括與這些解剖差異相關的特異性分子事件。具體結果將在會上介紹。

結論：精密醫學的進步需要包含多組學，這反過來又需要改變我們目前的組織采集標準操作規程。定義分子差異的能力，例如在結腸癌和結腸癌之間，將允許快速發現臨床上有用的預后和預測標志物，大大增加了我們對結腸癌生物學的基本認識。未來的工作將集中于發現新的靶點和信號，為臨床醫生創造出描述多組學結果的創新工具。

研究發起人：Indivumed Gmbh

參考文獻：John Marshall, et al. Multi-omics characterization of left-right colorectal cancer. 2021 ASCO, abs3542.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3543】全基因組分析表明癌相關成纖維細胞（CAF）通過免疫抑制影響結直腸癌（CRC）的預后

First Author: Yu-feng Chen, Department of Colorectal Surgery, The Sixth Affiliated  Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou, China

背景：腫瘤微環境中的癌相關成纖維細胞（CAF）與多發性實體瘤的預后不良和化療耐藥有關，但目前對CAF在結直腸癌中的檢測缺乏普遍性。本研究的目的是評估成纖維細胞在預測預后方面的特征，并分析相關機制。

方法：以316例未經輔助化療的大腸癌患者為研究對象，對成纖維細胞相關基因（frg）進行檢測。將1352例結直腸癌患者分為1個訓練隊列（n461）和2個驗證隊列（n=338，n=553），分別進行成纖維細胞相關基因標記（FRGS）的構建及其對Ⅱ/Ⅲ期結直腸癌患者預后價值的驗證。對其進行功能注釋和分析，揭示其作用機制。

結果：兩個驗證隊列（驗證1隊列：HR=1.90，95%CI=1.16-3.12，P<0.01；驗證2組：HR=1.95，95%CI=1.39-2.73，P<0.001）。無輔助化療的大腸癌患者CAF風險高與預后差相關（HR=3.63，95%CI=2.24-5.88，P<0.001），而接受輔助化療的患者CAF風險高與預后差無關（P=0.154）。在Validation-1隊列中也發現了類似的趨勢。結合臨床特點，經多因素分析校正腫瘤TNM分期后，FRGS為獨立預后因素（訓練隊列：HR=3.19，95%CI=1.88-5.41，P<0.001；驗證1孔口：HR=5.00，95%CI=1.58-15.85，P=0.007；驗證-2隊列：HR=2.99，95%CI=1.44-6.21，P=0.003）。此外，富集分析發現高caf風險組的抗腫瘤免疫反應受到抑制。

結論：11個基因FRGS對大腸癌患者有獨立的預后價值，并可預測化療的療效。腫瘤微環境中的CAF可能通過抑制免疫反應影響大腸癌患者的預后。

研究主辦單位：國家自然科學基金(NSFC) (No. 82003197).

參考文獻：Yu-feng Chen, et al. enome-wide analysis indicating cancer associated fibroblast (CAF) impacts on colorectal cancer (CRC) prognosis via immunosuppression.2021 ASCO, abs3543.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3544】NTRK融合陽性結直腸癌是一種獨特的大腸癌亞型，具有高腫瘤突變負擔和微衛星不穩定性。

First Author: Hui WANG, Department of Medical Oncology, Beijing Hospital, National Center of Gerontology; Institute of Geriatric Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing, China

背景：神經營養素受體酪氨酸激酶（NTRK）基因融合很少見但在各種實體腫瘤中存在的可操作的致癌因子。本研究的目的是確定頻率和臨床病理和遺傳NTRK驅動的大腸癌（CRC）的特征。方法：大腸癌患者的結腸和直腸tu-mor DNA樣本提交給中國經CLIA認證的基因組實驗室進行NTRK1/2/3分子生物學研究基于雜交的下一代靶向測序融合檢測（NGS）進行回顧性分析。從數據庫中檢索患者的人口統計學、臨床特征和治療史，以便進一步評估。

結果：共分析了2519例中國特有的大腸癌病例從2016年4月到2020年5月，確定了17個NTRK+融合事件（0.7%，17/2519）包括14例NTRK1+和3例NTRK3+fu。此外，17例NTRK+CRC腫瘤中有13例（76%）為微衛星不穩定性高（MSI-H）腫瘤，其發生率遠高于對照組未經分子選擇的大腸癌人群（8%）或NTRK+非大腸癌腫瘤（<1%). NTRK+CRC患者的腫瘤突變負擔也增加（中位數）TMB=65mut/MB）與非NTRK+CRC（中值TMB=7.7）相比mut/MB）或NTRK+非大腸癌（中位TMB=4mut/MB）。桿/POLD1與分子水平相比，NTRK+CRC突變也較豐富（8/17，47%）未分級結直腸癌患者（8%），半數以上患者同時攜帶桿狀病毒和桿狀病毒POLD1突變。TPM3是NTRK1最常見的融合伙伴（78%），N=14），其次是LMNA和TRP。發現三個NTRK3+CRC（ETV6）-NTRK3、RUNX1-NTRK3、CSNK1G1-NTRK3）。RNF43（71%）是最常見的突變基因，RNF43和ARID1的畸變在MSI陽性NTRK+腫瘤中顯著富集，而在MSS NTRK+腫瘤中顯著富集+分組。TP53（53%）和APC（35%）的畸變常同時發生NTRK融合，而NTRK+組群的大多數是RAS/BRAFwild型，除了一例癌基因KRAS Q61R變異體與之共發生外運行X1-NTRK3。

結論：NTRK+結直腸癌少見。除了在沒有典型驅動突變的情況下，NTRK+腫瘤表現出增加腫瘤突變負擔，微衛星不穩定性的更高頻率，以及相對于未經分子選擇的結直腸癌突變而言，極性/POLD1突變的豐富性。

Research Sponsor: None.

參考文獻：Hui WANG, et al. NTRK fusion positive colorectal cancer as a unique subset of CRC with high tumor mutation burden and microsatellite instability.2021 ASCO, abs3544.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3545】一組DNA甲基化標記物用于大腸癌患者共識分子亞型2和3的分類

FIRST Author:Inge van Den Berg, Erasmus MC, Rotterdam, Netherlands

背景：共識分子亞型(CMSS)可以指導結直腸癌(CRC)的精確治療。目前可用的檢測方法可以很好地識別CMS1和CMS4病例，但缺乏區分CMS2和CMS3的專用檢測方法。本研究旨在確定一組甲基化標記物來區分結直腸癌患者的CMS2和CM3。

方法：收集239例I-III期大腸癌患者的新鮮腫瘤組織。使用來自“CMS分類器”包的單樣本預測參數對RNA-seq數據進行CMS分類。使用Infinium HumanMethylation450珠芯片獲得甲基化圖譜。我們采用自適應分組正則化Logistic嶺回歸和事后分組加權彈性網絡標記選擇，建立了基于15、10或5個標記的CMS2和CMS3分型預測模型。來自TCGA的數據用于驗證。

結果：CMS2和CMS3之間的總體甲基化特征不同。根據探針相對于CpG島或相對于CMS分類器中存在的基因的位置進行分組規則化，從而產生兩種不同的預測模型以及隨后的不同的標記面板。對于這兩個小組，即使只使用5個標記物，敏感性、特異性和準確性也>90%。驗證顯示了類似的性能。

結論：我們的高度敏感和特異的甲基化標志物組合可以用于區分CMS2和CM3。這使得在大腸癌患者中建立一種qPCR DNA甲基化檢測方法能夠提供一種特異性和非侵入性的分類工具。

研究資助：無

參考文獻：Inge van Den Berg，et al.A panel of DNA methylation markers for the classification of consensus molecular subtypes 2 and 3 in patients with colorectal cancer.2021 ASCO.abs 3545.

編譯：陜西省中醫醫院 胡博帆

【3546】優化試驗解釋規則后基于液體活檢的甲基化試驗COLVERA的臨床表現

First Author: Zivjena Vucetic, Clinical Genomics, Bridgewater, NJ

背景：臨床指南建議對完成結直腸癌初級治療的患者進行監測，目的是在符合治療意圖的情況下檢測復發。目前推薦的監測方案，包括成像和癌胚抗原，在敏感性和特異性上都有局限性，因此檢測循環腫瘤DNA (ctDNA)的新方法已被引入臨床實踐。COLVERA是一種實驗室開發的實時聚合酶鏈反應檢測方法，可檢測BCAT1和IKZF1基因的DNA甲基化。這兩個基因在95%的結直腸癌組織中高度甲基化，與癌胚抗原相比，COLVERA對一些臨床人群中對復發疾病的檢測靈敏度提高。目前的研究評估了在結直腸癌監測中優化檢測的定性報告方法對復發檢測的可操作性和臨床表現的影響。

方法：對先前描述的兩組結直腸癌患者(322例和144例)進行評估，他們完成了初步治療并正在接受監測。成像和血液收集在標準護理訪視時或其附近進行。從全血中提取ctDNA，亞硫酸氫鹽處理，三倍檢測BCAT1/IKZF甲基化。以前，任一目標基因的任何陽性復制都被報告為COLVERA“檢測到”。在目前的研究中，當存在至少一個IKZF1的復制或多個IKZF1和/或BCAT1的復制時，COLVERA報告“檢測到”。使用放射成像作為臨床參考標準，從單個時間點血樣中檢測結直腸癌復發的敏感性、特異性和診斷優勢比(DOR)。

結果：在第一組(322例)中，COLVERA試驗總陽性率為6.5% (21/322)，敏感性為59.3% (95%置信區間:38.8 - 77.6)，特異性為98.3% (96.1 - 99.5)，在影像學鄰近時間點檢測復發，特異性從91.5% (87.7 - 94.4%)提高，敏感性從63.0%(42.4-80.6%)下降最小；類似地，在第二組(144例)中，敏感性為62% (47.2 -75.4)，而在先前解釋方法下為66.0%(57.1-69.3)，特異性為92.6% (85.3-97)，而在先前解釋方法下為90.4% (84.7 - 94.7)。高DOR：84 (26 - 272)(之前為18(7.6–44.4))表明，修訂后的COLVERA解釋方法在臨床上更具信息性，并更準確地區分有無疾病的患者。 

結論：COLVERA解釋規則的這一變化優化了臨床特異性，而對敏感性的影響最小。對于旨在幫助監測和檢測早期復發，準確性的提高使醫生對基于測試結果做出可操作的決策(包括進一步的成像或治療)更有信心。

參考文獻：Zivjena Vucetic, et al. Clinical performance of methylation-based liquid biopsy test COLVERA after optimization of test interpretation rules 2021 ASCO, abs3546.

編譯：山西醫科大學第一醫院 馬小樂

【3547】醫療補助擴大對西班牙裔早發結直腸癌發病率的影響

First Author: Shafia Rahman, Albert Einstein College of Medicine/Montefiore Medical Center, New York, NY

背景：早發性結直腸癌（EO-CRC，年齡<50歲）是一種突發性公共衛生危機；尤其是西班牙人。獲得醫療保健至關重要與醫療保險有關。2010年，經濟適用房然而，《醫療法案》允許在全國范圍內擴大醫療補助資格，美國最高法院2012年的裁決允許各州選擇退出在醫療保健市場進行了一次意外的實驗。我們評估了擴大醫療補助計劃對患有卵巢癌的西班牙裔患者EO-CRC發病率的影響這將導致發病率增加和早期發現的假說EO-CRC公司。

方法：利用國家癌癥數據庫收集有關腫瘤的資料新診斷的西班牙裔EO-CRC患者（40-49歲），所有階段，從2010-2017。2014年擴大醫療補助的21個州的數據，分析了16種非膨脹狀態。一年一度的州智者拉美裔從美國人口普查局收集了2010-17年的人口數據新的CRC病例數除以該州拉美裔人口的規模人口。采用分段Poisson廣義線性混合效應模型分析2014年前后EOCRC年發病率的變化率是增長的。

結果：西班牙裔EO-CRC的年平均發病率為6/100000和8/100000擴建前后，在ES中，以及8/100000和2014年前和2014年后分別為9/100000。EO-CRC AI增加每年為3.6%（2010-14）（95%置信區間：-0.1%至7.4%）和9.8%（2014-17）（95%可信區間：5.2%至14.7%）；6.4%（2010-14）（95%置信區間：2.1%至10.8%）和1%（2014-17）（95%置信區間：-3.8%至6.1%）。與NES（p=0.078）表相比，ES在擴張后（2014年）與擴張前相比，EO-CRC發病率發生了巨大變化。診斷時分期無差異在ES和NE之間的預擴展期和pos擴展期之間。

結論：ES中EO-CRC發病率的增加可能是由于獲得更多的醫療服務由于醫療補助的覆蓋面相比，新能源。另一個潛在因素是移民從NES到ES的符合醫療補助資格的人。不過，我們需要2017年之后的數據以確認當前的趨勢。

. Research Sponsor: None.

參考文獻：JShafia Rahman, et al. iEffect of Medicaid expansion on incidence of early-onset colorectal cancer incidence among Hispanics.2021 ASCO, abs3547.

編譯：青海省人民醫院 李勝

【3548】PMC：一個更精確的極點突變分類器，以確定免疫治療的候選對象

第一作者: Fadl Zeineddine, University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX

背景：DNA聚合酶epsilon(POL)的特定體細胞突變可導致腫瘤突變負荷(TMB)超過每兆基數100個突變的超級突變表型。據報道，極點突變腫瘤對免疫治療的反應是豐富的，這種聯系正在多個活躍的臨床試驗中得到驗證。然而，大多數極點突變是乘客突變，沒有致病作用。目前對極點突變進行分類的方法在準確性和完備性方面都有局限性，這可能導致免疫制劑在腫瘤中的不適當使用，如MSS CRC，其應答率為5%或更低。在這里，我們提出了一種新的分類器，極點突變分類器，或PMC，基于選擇性喪失極點的校對功能(LOP)而導致的獨特的三核苷酸突變特征。

方法：對cBioPortal進行查詢，找出所有存在極突變的腫瘤。計算每種腫瘤的TMB，此外，還獲得了TCGA中所有極點突變腫瘤的三核苷酸突變特征。使用OncoKB鑒定12個功能極點突變(n=98個腫瘤)的金標準，創建了一個極點突變特征。結合突變特征、氨基酸位置和TMB對每個極變異體進行分類。

結果：在所有48035個獨特腫瘤中，極點突變的總頻率為2.5%(n=1184)，但僅9.2%(n=110)被確定為導致選擇性LOP。LOP位點突變在子宮癌和大腸癌中的發生率最高，這兩種腫瘤的LOP突變與乘客突變的比率也最高。在一項泛癌癥分析中，羅波爾患者的總體存活率明顯高于乘客突變患者(尚未達到51mo，HR=4.4mo，p<0.0001)。使用Polyphen-2分類器進行類似的分析以識別功能極突變，結果顯示總體存活率沒有差異(HR=1.0，p值=0.57)。為了進一步驗證PMC分類器的改進的特異性，使用PMC分類器TMB作為替代標記物，98%的LOP腫瘤表現為高度突變(TMB>20mut/Mb)，而Polyphen-2稱之為功能性的腫瘤占53%。對MD Anderson大腸癌患者的回顧性分析發現，有25名患者患有LOP極突變，與267名伴有乘客極突變的大腸癌患者相比，他們的OS有所改善(尚未達到70個月，HR：4.2mo，p=0.028)。4例轉移性大腸癌LOP位點突變患者接受免疫治療(nivolumab或ipilimumab/nivolumab)2、3線治療，均取得客觀療效并持續治療(平均治療時間15mo)。

結論：PMC分類器專門識別導致校對功能喪失的極點突變，表現優于人工精選數據庫和基于機器學習的方法。使用極突變作為免疫治療選擇標準的臨床試驗應該僅限于那些引起LOP的極突變。

研究贊助商：美國國立衛生研究院、其他政府機構、美國國立衛生研究院

編譯：陜西省中醫醫院 胡博帆 

【3549】目前以家族病史為基礎的結直腸癌篩查指南對于早期發現和潛在預防年輕病例是否足夠？

第一作者：Y. Nancy You, Department of Colon and Rectal Surgery,University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX

背景：發現和預防年輕發病的結直腸癌(YOCRC，診斷為50歲以下)的策略至關重要。已制定的高危篩查指南(SGS)旨在檢測/預防由遺傳綜合征引起的YOCRCs。對于非遺傳性YOCR，平均風險篩查被考慮在較早的年齡，但基于家族史(FH)的高風險篩查研究較少。我們的目的是確定患有FH的非遺傳性YOCRC的比例，并確定現有的SGS是否可以發現/預防這些病例。

方法：回顧394例連續接受手術切除的青年大腸癌患者的腫瘤MMR狀態、家系和基因檢測。排除那些已知/疑似遺傳性綜合征(根據表型、MMR狀態和/或生殖系突變)的患者(N=65)。對329例結直腸癌患者的一級或二級親屬(FDR、SDR)和診斷年齡進行了家系分析。計算基于FH的CRC篩查的推薦年齡和YOCRC診斷年齡之間的差距。

結果：89例(27%)非遺傳性YOCRC患者的FH為結直腸癌。診斷年齡中位數為45歲；腫瘤多來自遠端結腸(22%)和直腸(60%)，III期(48%)和IV期(27%)。21名(24%)患者在64歲(中位數)時被診斷為22個FDR，71名(80%)患者在65歲(中位數)時被診斷為92個SDR。13例(15%)FH為YOCRC。現有的SGS認為39名患者(44%)處于高危狀態，其余患者平均風險(見表)。28例(31%[或46.52%])患者在YOCRC診斷前就開始篩查了。但在其余61名(69%[或43，48%])患者中，YOCRC診斷比推薦篩查年齡提前了5.3[或3.9]歲(表)。

結論：27%的非遺傳性YOCRC患者存在FH；15%的YOCRC患者存在FH。在近一半的患者中，YOCRC被診斷為比FH篩查的推薦年齡早了幾年，即使假設完全采用SG并在45歲開始進行平均風險篩查。提煉現有的基于FH的SGS可能會產生潛在的影響。

研究贊助商：安德森大學癌癥中心臨床創新者獎

編譯：陜西省中醫醫院 胡博帆